Tēma 2.3
Mūsdienu kriokonservācijas procedūras
Vairums cilvēku uztver kriokonservāciju kā vienkāršu izvēli: pieteikties vai nepieteikties. Taču izšķiroša nozīme ir procedūras kvalitātei, ko nevar novērtēt, neizprotot procesa praktiskos ierobežojumus. Par to jārunā tāpēc, ka fizikas un bioloģijas likumus nevar pakārtot cilvēka vēlmēm. Išēmiskais bojājums ar laiku pastiprinās, perfūzijai nepieciešama invazīva procedūra, un transportēšana kriogēnos apstākļos var būt sarežģīta. Mērķis ir sniegt pietiekami padziļinātu tehnisko izpratni, lai kriokonservācija no abstrakta jēdziena kļūtu par konkrētu procedūru kopumu, ko iespējams izprast un novērtēt.
Sākotnējā reaģēšana: dežūra un stabilizācijaKas notiek pēc juridiskās nāves konstatēšanas: gaidīšana, atdzesēšana, sirds un plaušu darbības atbalsts, medikamenti, mērījumi un pāreja uz krioprotektīvo perfūziju.Ķirurģiska procedūra (perfūzija un krioprotekcija)Kā asinsvadu piekļuve, asins izskalošana un pakāpeniska krioprotektantu perfūzija balansē ledus aizkavēšanu pret toksicitāti, osmotisko stresu un nevienmērīgu izplatīšanos.Loģistika: formalitātes un transportēšanaTomorrow.bio un vietējie apbedīšanas biroji kārto dokumentus, atļaujas un transportu uz Šveici. Kad dokumenti ir sakārtoti, transportēšana pa sauszemi un gaisu ir iestrādāta procedūra, nevis biedra pienākums.Biostasis kvalitātes pārbaudes procedūrasKrioprezervācijas kvalitātei ir nepieciešams papildu pierādījums: gadījuma laika noteikšana, perfūzijas telemetrija, standartizēta visu ķermeņa CT, konsentēto neirālo paraugu elektronmikroskopija, kontroles dzesēšanas dati un auditejamie ilgtermiņa uzglabāšanas ieraksti.Kontrolēta atdzesēšana līdz šķidrā slāpekļa temperatūraiTomorrow.bio izmanto datorvadītu dzesēšanu, vairākas iekšējas termopāru zondes un pakāpenisku protokolu: strauju kritumu tuvu stiklošanās pārejai, sprieguma mazinošu izturēšanu, tad apmēram 1°C stundā līdz -196°C.Kā laika gaitā attīstījās vitrifikācijas procedūrasVitrifikācija attīstījās, savienojot pakāpeniskus panākumus krioprotektantu ķīmijā, pakāpeniskā perfūzijā, ledus kontrolē, siltuma inženierijā, orgānu atgūšanā, tilpuma sasilšanā un tiešā struktūras mērīšanā.Ilgtermiņa uzglabāšanas centrsEBF centrs Rafcā apvieno pasīvu uzglabāšanu šķidrajā slāpeklī ar kontrolētu atdzesēšanu, kriogēnu datortomogrāfiju, CT, izpētes infrastruktūru, no pacientu finansēm nošķirtu kapitālu, Šveices fonda pārvaldību un pārbaudāmu ilgtermiņa darbību.Klasiskā kriogēnās glabāšanas sistēmaKā pasīvā glabāšana šķidrajā azotā apvieno vakuumizolētus Dewara traukus, iknedēļas papildināšanu, nepārtrauktu uzraudzību, dublētu automatizētu piepildīšanu, distances kontroli un cilvēku reakciju.Vidējas temperatūras krioģeniskā glabāšana (ITS)Tomorrow.bio ir saņēmusi pasaulē pirmo cilvēka izmēra ITS glabāšanas trauku. Pirms to izmantos pacientu glabāšanai, trauks vairākus mēnešus tiks testēts, vērtējot temperatūras stabilitāti, šķidrā slāpekļa patēriņu un sistēmas darbību atteices gadījumā.Išēmiskās iedarbības novērtēšana kriostāzē (S-MIX rādītājs)Kā S-MIX pārvērš laika, temperatūras un sniegtā atbalsta datus novērtētā normotermiski ekvivalentā išēmiskajā iedarbībā, tostarp aprēķinā, pieņēmumos, lietojumā un ierobežojumos.